薄层色谱小知识
1、怎样提高点样效率？
点样是造成TLC定量误差的主要来源。定量毛细管更适合较小体积的点样；微量注射器更适合较大体积的点样。这主要是因为微量注射器受小气泡、溶液回爬现象的影响较大。为避免不同定量毛细管理体制的占样误差，建议一块薄层板上最好用同一只定量毛细管。但应注意更换样品时，应将毛细管用超声波或不同极性溶课剂清洗干净。在制备样品时，溶样溶剂黏度不能过高，以便于点样；溶剂沸点过低则进样体积易变，过高则会改变展开剂组成；对样品溶解度过高会使样点发生空心现象，常用的溶剂为甲醇、乙醇、丙酮。经典TLC样点原点一般为直径3mm点间距离1-2cm底边距离1.5cm;HPLC样点原点一般为直径1mm点间距5mm底边距1cm.
2、展开剂的选择
TLC与HPLC相比，一个突出的优点就是流动相的选择具有更大的灵活性，流动相的选择的目的是使绝大部分样品的Rf值位于0.1－0.7之间并达到较好的分离，与此对应的是流动相要有适当的强度和组成。流动相强度越大，溶质Rf值越大，但很可能降低分离能力；另外单一溶剂很难分离较复杂的混合物、根据相似相溶原理，要使用多元溶剂体系。一般展开剂体系选择如下：根据分离样品性质、薄层色谱板性质选择一个二元溶剂体系，通过调节溶剂比例以寻求适合Rf值，适合的Rf值找到后，再寻求极性参数相同的二元溶剂体系两个，以这三个组成为三点组成一个三角形，则可看到：三角形顶点是二元体系，边是三元体系，三角形内是四元体系，并且极性一致，可根据几何原理得出任一点组成，这种方法较为直观，也较简单。
理想的显色希望灵敏度高，斑点颜色稳定、斑点与背景间的对比度好，斑点的大小及颜色的深度与物质的量成正比，在样品组成并不完全已知的情况下，通用显色方法显得尤为重要，通用显色方法主要有：1、紫外照射法：方便、不破坏样品； 2、碘蒸气法：通用性强，与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用； 3、荧光试剂：制造荧光背景，使原来紫外下无荧光物质被鉴别，有荧光物质更明显；
3、展开剂选择的大概原则
选择展开剂一般要用混合溶剂：一般要有一种对所要展开样品溶解度较大的溶剂，视样品的极性，再选用相应的体系。极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统极性较大的用甲醇：氯仿系统极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
我个人觉得以下的经验和所遇到的问题也很实用
2p222论坛白菜展开剂：分离的样品酸性比较大，一般在展开剂中加酸加甲酸是因为该样品是酸性的，加酸的量和该物质的酸性成正比关系，加水可能是因为你的样品是苷类的用酸水做一下缓冲，目的就是让斑点圆滑，不脱尾，展距良好。
饱和也非常重要，边缘效应很严重的不妨用下端浸在展开剂中的滤纸贴在展开缸的内壁，这样饱和效果会好一些 1)在层析缸口涂适量凡士林，增加密封性； 2)以展开剂边缘效应的大。范ㄕ箍疗胶馐奔涞某ざ，一般平衡时间在30分钟即可。
有机溶剂的极性，甲醇>氯仿，因此在氯仿：甲醇：氨水（10:1:0.6）这个展开剂中，如果极性略大，可适当降低甲醇比例；如极性太。墒实痹龃蠹状急壤。 氯仿：甲醇：氨水10:1:0.6和20：2：1.2极性肯定是相同的，这有问题吗？
另外还有一个问题，这个展开剂中，甲醇用量较。状加忠谆臃，容易产生边缘效应，要特别注意展开剂的平衡和层析缸的密封。 不同的展开系统意思是其中至少应该有一种溶剂不同（最好是不同分类组的溶剂），而不是比例不同。或者使用不同的固定相。
2p222论坛白菜展开：1.TLC中样品拖尾现象是什么原因?该如何解决? 2.TLC中样品跑成几乎为一条线，斑点没有清晰的分离，想请教一下这是什么原因造成的?一般情况下该如何解决?
造成问题1的原因基本相同：a、对于一些具有酸碱性的化学成分，在溶液中部分电离，事实上展开时存在分子、离子两种状态，以中性的有机试剂展开必然会出现两种层析行为，造成脱尾甚至是一条线。b、展开剂选择不当 c、点样量过大，样品超载
解决办法： a、在展开剂中加几滴甲酸或冰醋酸；b、展开时以氨水饱和c、减少点样量 d、参考文献，调整展开剂种类、比例
我想问问，2p222论坛白菜TLC二次展开，是在第一次展开显色后再在继续第二次展开，还是在第一次展开后，换另一种展开剂接着展开。浚 请哪位大侠指点一下
2p222论坛白菜TLC的二次展开。二次展开是依据样品定的，但肯定要在第一次展开后，将板晾干或吹干，再放入另一种展开剂中展开，有的样品二次展开还要换展开方向，和原方向垂直。所以要以实际分离样品需要而定。
2p222论坛白菜显色：1.在工作中研究过用硫酸乙醇显色作定量分析的品种，但凡加了CMC的板都易烘糊，尤其是温度高于100度时，后改用不加CMC辅的水板来作，就不会有烘糊现象，故也可推论CMC易于与硫酸起糊化反应。感觉辅水板关键是硅胶G与水的比例要达1：3.5左右，而且研磨后要尽快涂布，不能易于凝固而难于涂布，我是百思不得其解，难道CMC还有类似稳定剂的作用
2. “0.5%的板加热时间长了就会黑”，是在层析完，显色后吧，我也遇到过同样的情况，这只有严格控制加热显色的时间。 这个问题应该是这样回答：但凡加了CMC的板都易烘糊，尤其是温度高于100度时，若改用不加CMC辅的水板来作，就不会有烘糊现象，但不加CMC辅的板又太软，点样时容易点出洞，有个好办法是将CMC的浓度调至0.1%，这样就不易烘黑的。不信你试试，我们这边药检所都这样做的 。
3.2p222论坛白菜薄层板加热变黑的问题，其实很容易解决：当喷完显色剂后不用在放烘箱里烘了，可以用电吹风在板子背面吹吹就能显色了．我们实验室里一般都采用此法，简便、快洁．如果一非想使用烘箱烘的话，一定要用带玻璃窗的，当看到显色了就取出，不然不好控制显色时间，时间过长，ＣＭＣ容易碳化变黑。
4．各位楼主真是经验丰富，我铺的0.5%的板加热时间长了就会黑，有什么好着吗？ 根据我的经验，薄层版变黑与CMC－Na的浓度过大有关，如果你留意的话，你会发现，当显色剂中有浓硫酸时，加热时间稍长就会变黑（其他显色剂是没事的），我老师说这是因为浓硫酸把CMC－Na炭化了，其实[color=blue=这种情况你只要适当降低CMC-Na的浓度就可以了，当然如果不加CMC-Na的话容易把板弄破。一般我都是显色后用电吹风吹的，要均匀吹，电吹风离板的距离要远些，防止部分会黑。 另还要注意显色剂，如果显色剂中含有硫酸，加热时间一定要掌握好，不可太长。
5．CP2000中277页苏氨酸的TLC的其它氨基酸检查似乎有问题: ...以'正丁醇\丁酮\浓氨溶液\水'为展开剂，展开后，晾干，喷以茚三酮的丙酮溶液(1-50)，... 茚三酮与浓氨溶液起显色反应，弄得整块板都有
